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抗生素的介紹

點(diǎn)擊次數(shù):1537 更新時(shí)間:2016-08-05

在細(xì)胞培養(yǎng)中zui常用的抗生素是(常用濃度是25~100ui/ml)與(25~100μg/ml)。這兩種抗生素?;旌鲜褂?。在一些實(shí)驗(yàn)室里,它們常規(guī)加入所有的培養(yǎng)基中。(10~100μg/ml)通常有廣譜抗菌效應(yīng),并具有溶液穩(wěn)定性,故也被一些實(shí)驗(yàn)室使用,特別是當(dāng)有低水平的污染存在時(shí)更是這樣。以上這些試劑對(duì)霉菌與酵母菌的污染均無(wú)效。

盡管很多實(shí)驗(yàn)室在細(xì)胞系的培養(yǎng)基中常規(guī)加入抗生素作繼代培養(yǎng),但仍建議不要在原代培養(yǎng)中加入抗生素,其理由之一是獲得的細(xì)胞是無(wú)菌的,原代培養(yǎng)時(shí)的細(xì)菌污染很少發(fā)生。其次,盡管認(rèn)為抗生素對(duì)細(xì)胞代謝的影響可忽略,但避免使用它們,以免細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境的不穩(wěn)定。zui重要的是要意識(shí)到培養(yǎng)中主要污染物的類型,它們通常暗示了問(wèn)題的來(lái)源。

抗有絲分裂劑

某些DNA合成抑制劑對(duì)分裂細(xì)胞有毒,但對(duì)沒(méi)有DNA合成的細(xì)胞僅有輕微影響。由于神經(jīng)元通常缺乏DNA合成能力,因此對(duì)抗有絲分裂劑沒(méi)有多大反應(yīng)。這樣的試劑常常用于神經(jīng)元的培養(yǎng),以消除或減少非神經(jīng)元群體。若要?dú)⑺浪械姆巧窠?jīng)元細(xì)胞,可以先加入血清或生長(zhǎng)因子來(lái)保證有高比例的非神經(jīng)元細(xì)胞進(jìn)行DNA合成,此時(shí)再加入抗有絲分裂劑。但是,某些細(xì)胞在它的細(xì)胞周期的某些時(shí)相時(shí)對(duì)抗有絲分裂劑是不敏感的。不過(guò),可以重復(fù)的將抗有絲分裂劑使用于增殖的細(xì)胞群體。在CNS神經(jīng)元的培養(yǎng)中抗有絲分裂劑常常在星形細(xì)胞形成單層后加入,此時(shí),星形細(xì)胞由于接觸抑制而終止了DNA的合成(即細(xì)胞停止增殖),它們不會(huì)因抗有絲分裂劑的加入而死亡。原代培養(yǎng)中用這種方法阻止成纖維細(xì)胞的過(guò)度增殖是十分必要的。有兩種抗有絲分裂劑常用于神經(jīng)元的培養(yǎng): Fluorodexyuridine,是胸苷合成酶抑制劑,一般使用濃度為~10μM。尿苷(10μM)也常使用,可阻止不分裂細(xì)胞的RNA合成。另外,阿糖胞苷也常被使用,其使用濃度為5~50μM。使用任何一種抗有絲分裂劑,都必須考慮它的神經(jīng)原毒性,應(yīng)該確定zui低效應(yīng)的使用濃度。阿糖胞苷在很低的濃度下,也會(huì)對(duì)某些種類的神經(jīng)元有毒性,可以造成特定神經(jīng)原的死亡。其他的抗有絲分裂劑尚未表現(xiàn)出這種毒性。

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