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技術(shù)文章   Article首頁>>技術(shù)文章>>ALP-B Elisa Kit使用要求都有什么?

ALP-B Elisa Kit使用要求都有什么?

點(diǎn)擊次數(shù):1189 更新時間:2022-08-09

  ALP-B Elisa Kit實驗原理:

  本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人骨特異性堿性磷酸酶水平。用純化的人骨特異性堿性磷酸酶抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入骨特異性堿性磷酸酶,再與HRP標(biāo)記的骨特異性堿性磷酸酶抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的骨特異性堿性磷酸酶呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人骨特異性堿性磷酸酶濃度。
  ALP-B Elisa Kit使用要求如下:
  試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
  濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
  各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
  請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)?! 》獍迥ぶ幌抟淮涡允褂茫员苊饨徊嫖廴?。底物請避光保存。
  嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
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